Comparaison De L’activite Proteasique Des Souches De Bacillus Thuringiensis Strains

Au cours de ce travail, il est réalisé un criblage parmi 4 souches réceptrices de B. thuringiensis visant la souche la moins productrice en enzymes protéolytiques. Il est noté que l’activité protéolytique des sous espèces israelensis 14T et 4Q7 après 48h, est d’une valeur de 165.9 UI et de 138.08 UI, respectivement, alors que celle pour les sous espèces kurstaki HD1cryB et BUPM95 est de 95.36 UI et de 400.62 UI, respectivement. Ainsi, il est choisi les souches HD1cryB et 4Q7 comme cellules hôtes pour le plasmide pHT-Blue-vip3Aa16. La vérification de l’électroporation des souches recombinantes de B. thuringiensis est réalisée par amplification PCR puisqu’il est retrouvé une bande de 820 pb reconnue au niveau du gène vip3Aa16. La synthèse de la protéine Vip3Aa16 à partir des souches recombinantes HD1cryB (pHT-Blue-vip3Aa16) et 4Q7 (pHT-Blue-vip3Aa16) a démontré que les protéases qu’héberge HD1cryB n’ont pas influé le taux d’expression de la protéine Vip3Aa16. La souche HD1cryB de B. thuringiensis pourrait être une souche réceptrice très adéquate. During this work, a screening among 4 receiving host cells of B. thuringiensis was realized in order to distinguish the least producing proteolytic enzymes strain. We found that the proteolytic activity of the B. thuringiensis subspecies israelensis 14T and 4Q7 after 48 hours is about 165.9 IU and at 138.08 IU, respectively. While the B. thuringiensis subspecies kurstaki HD1cryB and the cured BUPM95 is about 95.36 IU and 400.62 IU, respectively. Therefore, HD1cryB and 4Q7 were chosen as hosts cells for the pHT-Blue-vip3Aa16 plasmid. The electroporation of B. thuringiensis strains was verified via the PCR amplification since a band of 820 pb corresponding to the vip3Aa16 gene was detected. The synthesis of the protein Vip3Aa16 from the recombinant strains HD1cryB (pHT-Blue-vip3Aa16) and 4Q7 (pHT-Blue-vip3Aa16) demonstrated that HD1cryB proteases did not affect the Vip3Aa16 expression rate. Thus, the B. thuringiensis HD1cryB could be a very suitable host strain.